関節リウマチの前臨床薬効試験用として、C57BL/6、DBA、BALB/c などさまざまな系統の安定した関節リウマチ (RA) マウスモデルを提供しています。
また、自己免疫疾患および炎症性疾患研究における薬力学的評価と試験を含め、RA治療薬の開発もサポートしています。
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関節リウマチ（RA）は、最も一般的な自己免疫疾患の一つであり、関節の腫れ、痛み、運動障害を特徴とします。重度の場合、RAは障害を引き起こし、滑膜過形成、軟骨損傷、骨侵食などの病理学的特徴が見られます。
コラーゲン誘発性関節炎（CIA）：
関節軟骨の主要成分であるII型コラーゲン（CII）で免疫化することによって誘発されます。CIAマウスは自己免疫性多関節炎を発症し、ヒトRAの臨床的および組織学的特徴を模倣します。
コラーゲン抗体誘発性関節炎（CAIA）：
抗コラーゲン抗体の注射によって引き起こされます。このモデルは疾患の発症が急速で、急性関節炎の進行を研究するために広く使用されます。
アジュバント誘発性関節炎（AIA）：
フレンドアジュバント関節炎とも呼ばれ、ヒトRAの多くの臨床的特徴を反映しており、完全フレンドアジュバント（CFA）と不完全フレンドアジュバント（IFA）に分けられます。CFAは最も多く研究されているRAの自己免疫モデルです。
RA治療法の開発をサポートするため、当社はC57BL/6、DBA、BALB/cを含む複数の系統でさまざまな安定した信頼性のあるRAマウスモデルを確立しました。これらのモデルは、薬剤候補の前臨床有効性評価に適しています。
| Readout | ||
| Included tests | Phenotype | Body weight |
| Clinical score | ||
| Histopathology | H&E(Paws) | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Peripheral blood flow cytometry | Flow cytometry assay | |
| Mice strains |
| B-hIL6/hIL6R |
| B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1 |
| B-hOX40hOX40L |
| B-hCD40 |
| B-hPD1 |
| Clinical score | Symptoms of CIA |
| Score 0 | Normal |
| Score 1 | Redness and swelling of one joint type (A, B, C) |
| Score 2 | Redness and swelling of both joint types (A, B, C) |
| Score 3 | Redness and swelling of the three joint types (A, B, C) |
| Score 4 | The whole paw is red and swollen to the maximum extent |
| Joint types: A: interphalangeal joint B: metacarpophalangeal joint C: wrist and tarsal joint | |
コラーゲン誘発性関節炎 DBA/1マウスまたはC57BL/6マウスに、CⅡエマルジョンを0日目（200μg）および21日目（200μg）に投与しました。2回目の免疫後、週2回体重（A）および臨床スコア（B）を記録し、関節炎の発症率（C）を算出しました。エンドポイントで骨組織を採取し、H&E染色を行いました（D, E）。平均±標準誤差、n=4-10。(*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001)。
CIAマウスモデルに対するメトトレキサートの作用
(A) マウス体重の変化、(B) 臨床スコア、(C) マウスの発病率、(D) 病理スコア、(E) 病理切片のH&E染色。平均±標準誤差（*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001）。
CIAマウスモデルにおける抗ヒトIL-6抗体sirukumabの有効性（A）マウス体重の変化、（B）臨床スコア。結果は、モデルが正常に確立された後、sirukumab抗体で治療されたグループ（G3、G4）のマウスが用量依存的に臨床スコアの改善を示したことを示しています。終了時には四肢関節の組織病理学的検査が行われました。（C）H&E染色。（D）関節病理学スコア。平均±SEM
B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1マウスとC57BL/6マウスにおけるコラーゲン（CII）による関節炎の誘発
（A）マウス体重の変化、（B）臨床スコア。結果は、B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1マウスで臨床スコアが有意に増加し、関節炎モデルが正常に確立されたことを示しています。平均±SEM。
関節炎確立後のB-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1マウスおよびC57BL/6マウスの病理解析
（A）病理学的スコア、（B）病理切片のH&E染色（a）滑膜、（b）炎症細胞の浸潤、（c）滑膜の過形成、（d）骨構造の損傷、（e）骨髄中の炎症細胞。モデル群では皮下の混合炎症細胞浸潤、関節周囲の狭窄、関節軟骨および骨組織の破壊などの関節病変が観察され、関節炎モデルが正常に確立されたことが示されています。平均±SEM。
CIAマウスモデルにおける抗ヒトTNF-α抗体Adalimumabの有効性 (A)マウスの体重変化、(B)臨床スコア。高用量のAdalimumab投与を受けたG4群は、G2群に比べて臨床スコアが低下しました。(C)終了時にマウスの関節を採取し、H&E染色を行いました。(D)病理学的スコア。平均値±SEM。
CIAマウスモデルにおける抗ヒトOX40L抗体Amlitelimabの有効性
(A)実験デザインの概略図
(B)臨床スコア。Amlitelimab治療（G3）はCIAモデルにおいて臨床スコアを低下させました。データは平均値±SEMで示され、二次元配置分散分析を行い、G2群との比較でDunnett検定が行われました。（*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001）。(C)終了時にマウスの関節を採取し、H&E染色を行い、病理スコアが示されました(D)。データは平均値±SEMで示され、一次元配置分散分析を用い、G2群との比較でDunnett検定が行われました。（*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001）。
CIAマウスモデルにおける抗ヒトCD40抗体の有効性
(A)実験デザインの概略図
(B)臨床スコア。(C)発症率；(D)研究終了時にマウスの関節を採取し、H&E染色を行い、病理スコアが示されました。抗CD40治療は、CIA動物の発症率と臨床スコアを低下させました（G4-G6）。データは平均値±SEMで示され、一次元配置分散分析を行い、G3群との比較でDunnett検定が行われました。（*p<0.05, **p<0.01, ***p<0.001, ****p<0.0001）。(E)関節組織学的スコア。(F)マウスの体重変化。データは平均値±SEMで示され、一次元配置分散分析を行い、G3群との比較で多重比較検定が行われました。（*p<0.05）。
B-hPD-1マウスにおけるコラーゲン誘発性関節炎 (A) 臨床スコア。 (B) 発症率 (C) CIAモデル化後のB-hPD-1マウスの体重変化。平均値 ± 標準誤差。
| Mice | Gender | Incidence on Day28 | Incidence on Day32 |
| B-hIL6/hIL6R mice | M | 34% | 40% |
| B-hTLR8 mice | F | 60% | 50% |
| B-hCD40 mice | F | 50% | 50% |
| B-hOX40/OX40L mice | M | 20% | 60% |
| B-hPD1 mice | F | 60% | 60% |
| M | 60% | 80% | |
| B-hTNFA/hTNFR2/hTNFR1 mice | F | 48% | 55% |
| M | 80% | 80% |
| Readout | ||
| Included tests | Phenotype | Body weight |
| Clinical score | ||
| Histopathology | H&E(Paws) | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Peripheral blood flow cytometry | FACS test | |
| Mice strains |
| C57BL/6 |
| BALB/c |
| B-hTNFA |
| Clinical score | Symptoms of CIA |
| Score 0 | Normal |
| Score 1 | Redness and swelling of one joint type (A, B, C) |
| Score 2 | Redness and swelling of both joint types (A, B, C) |
| Score 3 | Redness and swelling of the three joint types (A, B, C) |
| Score 4 | The whole paw is red and swollen to the maximum extent |
| Joint types: A: interphalangeal joint B: metacarpophalangeal joint C: wrist and tarsal joint | |
コラーゲン抗体誘発性関節炎 C57BL/6マウスにおけるCAIAモデルの臨床スコア(A)と発症率(B)。二次元配置分散および多重比較を使用。結果は平均値 ± 標準誤差で表されます。****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05。(C) マウスの関節を採取し、H&E染色を行い、病理スコアを示しました(D)。
コラーゲン抗体誘発関節炎に対するメトトレキサートの有効性 マウスは0日目にmAbを投与され、3日目にLPSを投与されました。3日目から毎日体重(A)と臨床スコア(B)を記録しました。結果は平均値 ± 標準誤差で表されています。****p<0.0001, ***p<0.001, **p<0.01, *p<0.05。
図1. B-hTNFAマウスのCAIAに対するテスト物質の体重変化 G1非誘発コントロール群と比較して、G2誘発群ではCAIA誘発後に体重が有意に減少しました(A, B)。テスト物質、メトトレキサート(G3)およびアダリムマブ(G4)処理群では、G2群と比較して体重の有意な減少は見られませんでした。二次元配置分散分析を行い、すべての群をG2群と比較して多重比較検定が行いました。データは平均値±SEMで示されています。****p<0.0001、***p<0.001、**p<0.01、*p<0.05。
図2. B-hTNFAマウスのCAIAに対するテスト物質の臨床スコア G1非誘発コントロール群と比較して、G2誘発群ではCAIA誘発後に臨床スコアが有意に増加しました。メトトレキサート(G3)およびアダリムマブ(G4)処理群は、G2群に比べて臨床スコアが低下し、有効性を示しました。二次元配置分散分析を行い、すべての群をG2群と比較して多重比較検定が行われました。データは平均値±SEMで示されました*p<0.05、**p<0.01、***p<0.001、****p<0.0001（G1の有意性は示されていません）。
図3. B-hTNFAマウスのCAIA（左後肢組織）においてテスト物質が与えるサイトカインレベル G2誘導群と比較して、G2非誘導群ではマウス左後肢のIL-6、IL-10、IFN-γの発現レベルに有意な差は見られなかったが、IL-1βはG1とG2の間で有意に増加し、G3およびG4のテスト物質処理群で逆転しました。データは平均値±SEMで示され、一次元配置分散分析を行い、G2群との比較でDunnett検定が行われました。データは平均値±SEMで示されます。****p<0.0001、***p<0.001、**p<0.01、*p<0.05。
ラットのアジュバント誘発性関節炎
doi: 10.1002/0471142735.im1504s19
ヒートショックタンパク65の病原性エピトープと保護性エピトープに対するT細胞は交差反応性があり、機能的類似性を示しました：自己免疫性関節炎の制御における新たな側面。
| Readout | ||
| Included tests | Phenotype | Body weight |
| Clinical score | ||
| Histopathology | H&E(Paws) | |
| Optional tests | Tissue homogenate | Cytokines test |
| Peripheral blood flow cytometry | FACS test | |
| Mice strains |
| SD rat |
| Score | Symptom |
| Score 0 | No erythema or swelling |
| Score 1 | Slight erythema or swelling of one of the toes or fingers |
| Score 2 | Erythema and swelling of more than one toe or finger |
| Score 3 | Erythema and swelling of the ankle or wrist |
| Score 4 | Complete erythema and swelling of toes or fingers and ankle or wrist, and inability to bend the ankle or wrist |
ラットのアジュバント誘発性関節炎（AIA） 7週齢の雄ラットの0日に尾基部にMT/IFA（10mg/mL、100μL）懸濁液を皮下投与し（G1、n=5、G2、n=3）、7日目から終了時まで2日に1回体重とスコアを記録しました(A)。アジュバントによってラットの爪に腫れと発赤が生じ（B）、すべてのAIAラットの爪にスコアが付けられました（C）。H&E染色によりAIAラットの炎症、血管性膨疹、滑膜増生が観察されました（D、E）。データは平均値±SEMで示されます****p<0.0001、***p<0.001、**p<0.01、*p<0.05。
