HLA-A2.1/MAGEA1 特異的 TCR を導入したヒト T 細胞は、細胞傷害活性と IFN-γ 産生を誘導
HLA-A2.1/MAGEA1 特異的 TCR を導入したヒト T 細胞の大部分は、MAGEA1-HLA-A2.1 陽性細胞株 A375、U2OS、および U266B1 に対して細胞傷害活性を示し、IFN-γ を産生しました。
RenTCR™プラットフォーム由来のTCRは、ヒトドナー由来のTCRよりも高いペプチド感受性を示します
MAGEA1ペプチドを負荷したT2細胞による刺激に応答して、TCRを導入したヒトT細胞が産生するIFN-γ。ヒトドナー由来TCRには、臨床開発段階にあるもの、または学術文献で報告されているものが含まれます。データは最大IFN-γ放出量を基準に正規化し、4パラメータロジスティックモデルを用いてフィッティングしています。
候補TCRではオフターゲット反応性が認められませんでした
（A）変異導入交差反応性（X-scan）ライブラリー由来のペプチドを負荷したT2細胞で刺激し、TCR-T細胞によるIFN-γ産生を測定しました。ヒートマップは認識モチーフ（閾値：相対IFN-γ産生量5%）を示しており、これを用いてヒトプロテオームデータベースをスクリーニングしました。（B）X-scanによって特定され、HLA-A*02:01への結合が予測されたペプチドのみを、さらなる解析の対象としました。これらのペプチドプール（各ペプチド濃度10⁻⁶ M）を負荷したT2細胞でTCR-T細胞を刺激し、IFN-γ ELISAによって認識を評価しました。（C）認識されたオフターゲットペプチドについて、用量反応試験により検証しました。（D）推定オフターゲットタンパク質をコードする遺伝子を過剰発現させた腫瘍細胞株とTCR-T細胞を共培養しました（E:T = 5:1、18時間）。（E）TCR-T細胞を、HLA-A*02:01⁺/MAGEA1⁻、HLA-A*02:01⁻/MAGEA1⁻、またはHLA-A*02:01⁻/MAGEA1⁺の各細胞株と18時間共培養しました（E:T = 1.5:1）。臨床開発段階にあるTCR分子を陽性対照（pos ctrl）として使用しました。各実験におけるIFN-γ分泌量はELISAで定量しました。
HLA-A2.1/MAGEA1特異的TCRはin vivoで腫瘍増殖を抑制します
MAGEA1を内因性に発現するヒトHLA-A*02:01陽性腫瘍細胞株U266B1およびNCI-H1703を、NDG免疫不全マウスに移植しました。腫瘍体積が100 mm³に達した時点で、MAGEA1特異的TCRを発現するT細胞または模擬処理（mock）T細胞を投与しました（各群n = 6匹）。S.C.：皮下注射；I.V.：静脈内注射；TIW：週3回。
