当社の革新的な遺伝子編集技術は、遺伝子編集効率を10倍から20倍に向上させ、研究のためのカスタムモデル開発をより迅速かつ費用効果的にします。
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CRISPR（クラスター状定期間隔短回文繰返し配列）は、細菌で最初に発見された防御メカニズムで、侵入したウイルスDNAやその他の外来DNAを分解します。現在、最も一般的に使用されているのは、A群溶血性レンサ球菌由来のCRISPR/Cas9システムです。
Cas9タンパク質は最初にCRISPR RNA（crRNA）およびTRACER RNA（tracrRNA）と結合して複合体を形成し、次にターゲット配列に結合してRNA-DNA複合体を形成します。この複合体は最終的にDNAに二本鎖切断を引き起こします。crRNAはターゲットDNA配列を認識し、tracrRNAはCas9活性に必要不可欠な保守的な成分です。
実験室での遺伝子編集手順を簡素化するために、crRNAとtracrRNAは融合して単一ガイドRNA（sgRNA）を形成します。ターゲット遺伝子は、sgRNAとCas9タンパク質を発現するプラスミドを細胞に導入することによって編集できます。CRISPR/Cas9技術は、細菌、酵母、植物、魚類、哺乳類で成功裏に使用され、最も効率的なゲノム編集技術です。
最近、遺伝子編集サービスはCRISPR/Cas9ベースの遺伝子編集に焦点を当てており、その効率と多様性により、ほとんどの商業的遺伝子ターゲティングサービスの金標準となっています。標準的なCRISPR/Cas9サービス技術では、外来DNAとターゲットゲノムの間の相同組換え効率が低いことが多いことは事実です。しかし、
Biocytogenは、CRISPR/Cas9遺伝子ターゲティングプラットフォームに基づく革新的な極限遺伝子編集（EGE™）システムを開発しました。EGE™はターゲット部位に特異的な遺伝子編集を行い、CRISPR/Cas9単独に比べて大きなDNA断片のノックイン効率が最大20倍高く、さまざまなタイプの遺伝子修飾マウス/ラットや細胞モデルの作成に最適です。その結果、EGE™は遺伝子編集動物モデルの生成時間を短縮し、Biocytogenの遺伝子編集サービスの成功率は98%に達しています。
EGE™で作成できる遺伝子修飾モデルの例には、従来型ノックアウト/ノックイン、条件付きノックアウト/ノックイン、安全港遺伝子挿入、人間化などがあります。
Biocytogenでは、マウスの85%およびラットの100%の遺伝子編集プロジェクトがEGE™技術で生成されています。EGE™技術は比較的安価で、ESCベースのプロジェクトよりも迅速なターンアラウンドタイムを提供しますが、ノックインサイズが18kbを超えるプロジェクトにはESC/HR技術の使用が必要です。
| High Speed | The F0 generation positive mouse can be obtained in two months at the earliest, while the F1 generation can be obtained in five months |
| Zero Risk | Supported by a strong production platform, customers will be fully refunded if the project fails |
| High Efficiency | Compared with standard CRISPR/Cas9 technology, the efficiency of homologous recombination mediated by the EGE™ system is increased by 10-20 fold |
| High Quality | Southern blot screening minimizes follow-up experimental risks caused by random insertions |
| Diversification | Conventional knockout, conditional knockout, and gene knockin, etc. |
| No Species Limitation | Cell line, mouse, rat, pig, monkey, and zebra fish, etc. |
Biocytogenでは、専門家が品質管理（QC）の重要性を深く理解しており、それがプロジェクトの成功と失敗を分ける決定的な要因となることを知っています。私たちの厳格な品質管理についてもっと学んでください。
解析結果によると、CRISPR/Cas9ベースのEGE™プロジェクトの32%でランダム挿入（ターゲットベクター由来）が発生しました。これらの挿入を含む動物モデルの14%は繁殖によっても除去できず、最も精緻に設計されたCRISPRサービスでも排除できません。サザンブロット分析はランダム挿入を検出するための金標準です。Biocytogenは、遺伝子編集動物モデルにランダム挿入がないことを確認するためにサザンブロット分析の使用を推奨します。
