紹介

マウス胚性幹細胞ターゲティングプロセス

胚性幹細胞またはESCベースの遺伝子ターゲティングは、幹細胞の可塑性を利用して遺伝子ターゲットマウスを作成します。まず、ターゲティングベクターを幹細胞に電気穿孔します。ターゲティングベクターとESC細胞DNAの間で成功した同源再組換えが行われた後、ターゲットとなる胚性幹細胞は通常のマウス胚泡に注入されます。注入後、幹細胞は胚泡内で定植し、異なる遺伝子型を持つキメラを形成します。その後、胚泡は宿主マウスに移植され、そこから交配してターゲット遺伝子の胚系伝達を持つ小鼠を生成します。

BiocytogenのESCベース遺伝子編集の利点

従来の方法でも遺伝子編集は可能ですが、ESC/HRベースの遺伝子編集には以下の利点があります：

サービスワークフロー

ノックアウトマウスモデル

ESCをベースにした遺伝子ノックアウトターゲティングでは、ターゲット遺伝子の外因子を陽性選択マーカーで置き換えます。ターゲット遺伝子は全身で削除され、条件付きノックアウト動物では、特定の細胞でのみ遺伝子が削除されます。条件付きノックアウトマウスモデルは通常、Cre-LoxPまたはFlp-Frtリコンビネーションシステムを使用して生成されます。

ノックインマウスモデル

ノックインマウスを作成するために、関心のあるDNA断片をゲノム内の特定の位置に挿入します。この方法は、点突然変異、レポーター遺伝子（GFP）、タグ（FLAG）、Cre、ヒト化マウスなど、さまざまなモデルの作成を可能にします。